对于降级，如果WB实验条有问题，
Sieba姐妹建议可以根据以下五个标准对它们进行逐一分析：
1，看样
由于我们从源头上寻找问题，因此我们需要首先查看示例。
是内源蛋白还是重组蛋白？
对于内源蛋白，对于重组蛋白，
因此，建议检查重组蛋白是否为全长序列。
如果样品是重组蛋白而不是全长序列，则条带大小应与预期大小不符。
2，多种同工型要仔细鉴定
如果确定样品为内源蛋白，请检查目标蛋白中是否还有其他蛋白
通常由NCBI或SWISSPROT确认的同工型。
当您进行实验时，结果将更改为其他异构体和忙碌的一餐。
3，需要注意切割激活
如果SWISSPROT或批准的文献指出样品蛋白需要通过裂解激活，则结果将与预期值不同。
4.增加多聚体的增长
如果蛋白质大小与预测值有显着的多重关系，请考虑蛋白质是二聚体还是多聚体。
5，蛋白质修饰应增加
除上述四个原因外，预测值与实验结果不一致。这是因为您面临的蛋白质是易挥发的物体，不仅会阻止激活，而且在翻译后会对其进行纠正。
实例：甲基化，乙酰化，磷酸化，糖基化，烷基化，生物素化，谷氨酸，糖基化，硫酸化，打褶，脂氧化，磷酸泛素BAmination ...巴拉巴拉。
对处于不同状态的蛋白质有各种修饰。
添加官能团会使蛋白质比预期的大。
在常规实验中，糖基化是一种相对常见的修饰，通常会产生比预期更大的条带。
苏学宝最终将总结世界银行的规模和预测值是否不一致。
如果外来蛋白质不是全长序列，请确定该蛋白质是内源的还是外源的。
SWISSPROT数据库询问蛋白质中是否还有其他同工型。
SWISSPROT和文献询问该蛋白是否具有切割活性，以及??是否通过切割激活而变小。
确定蛋白质是二聚体还是多聚体。
NCBI和SWISSPROT询问蛋白质表达后是否存在修饰。如果经过修饰，则会导致蛋白质增加。
以上是雪巴姐姐的五个秘诀。分析您的脱模问题就足够了。
如果使用这5种方法找不到问题，则需要回顾过去以查看它在其他地方是否不可预测或错误。
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